白癜风可能治好吗 https://news.39.net/bjzkhbzy/180529/6288655.html研究亮点使用带有RD-TR包膜的伪CD19-CAR逆转录病*载体，并与Vectofusin-1结合作为转导增强子，极大提高了外周血来源NK细胞的转导效率，生成了具有功能和高细胞*性的CD19-CAR-NK细胞。研究摘要对CD19有特异性的自体嵌合抗原受体修饰(CAR)T细胞在临床试验中对复发和难治性b细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)显示出强大的抗肿瘤疗效。与T细胞相反，自然杀伤(NK)细胞以非抗原特异性的方式杀死目标，且不存在诱导移植物抗宿主病(GvHD)的风险，允许供者来源的细胞在异体环境中应用。因此，与自体CAR-T细胞不同，治疗性CD19-CAR-NK细胞可以作为健康捐赠者的现成产品产生。然而，外周血(PB)来源的NK细胞的基因工程仍然具有挑战性，需要优化的方案。本研究中，通过α逆转录病*转导来优化CD19-CAR-NK细胞的生成，以提高NK细胞的高抗白血病能力。通过比较了两种不同的逆转录病*载体平台，慢病*和α逆转录病*，两者都结合了两种不同的转导增强子(Retronectin和Vectofusin-1)。同时进一步探索了不同的NK细胞分离技术(NK细胞富集和CD3/CD19去除)，以确定最有效的NK细胞基因工程方法。研究结果表明，使用RD-TR伪逆转录病*载体转导NK细胞，结合Vectofusin-1是生成CD19-CAR-NK细胞最有效的方法。Retronectin转导增强子对慢病*/VSV-G基因转染NK细胞具有增强作用，但对逆转录病*/RD-TR无效。此外，由α逆转录病*/RD-TR和慢病*/RD-TR载体递送CD19-CARs的NK细胞的基于vectofusin的转导效果优于慢病*/VSV-G载体。最终生成的CD19-CAR-NK细胞对表达cd19的靶细胞显示出更强的细胞*性活性，与未转导的NK细胞相比，达到高达90%的杀伤活性。总之，本研究提出了使用RD-TR拟型逆转录病*颗粒联合Vectofusin-1作为一种成功的策略来基因修饰外周血来源的NK细胞，以获得高细胞*性的CD19-CAR-NK细胞。
比较慢病*中采用Retronectin或Vectofusin-1两种转导增强子对NK细胞转导效率
通过NK细胞富集或CD3/CD19去除得到的从PBMCs中分离出的NK细胞，用VSV-G拟型慢病*转导CD19-CAR颗粒，两者转导效率相似
α逆转录病*/RD-TR修饰的NK细胞转导率优于慢病*/VSV-G修饰的NK细胞
CD19-CAR-NK细胞的细胞因子分泌
比较由慢病*/VSV-G或α逆转录病*/RD-TR转导产生的CD19-CAR-NK细胞的细胞*活性
慢病*/RD-TR修饰的NK细胞和α逆转录病*/RD-TR修饰的NK细胞转导率没有差异
分析RD-TR拟型慢病*介导CD19-CAR颗粒产生的CD19-CAR-NK细胞的细胞因子分泌和细胞*性能力
参考文献：HighCytotoxicEfficiencyofLentivirallyandAlpharetrovirallyEngineeredCD19-SpecificChimericAntigenReceptorNaturalKillerCellsAgainstAcuteLymphoblasticLeukemia.FrontImmunol.;10:.