一、CML概述
慢性髓性白血病（chronicmyelogenousleukemia,CML）是一种以髓系增生为主的造血干细胞恶性疾病，是一种骨髓增殖性肿瘤，它主要影响骨髓中的干细胞，导致白细胞异常增多。
CML全球的年发病率为（1～2）/10万，占成人白血病总数的15%～20%，各个年龄组中均可发生；随着年龄增长发病率逐渐增加，中位诊断年龄在亚洲国家偏年轻（40～50岁），欧美国家年长（55～65岁），男女比例约1.4∶1，自然病程为3～5年。
CML的发病机制与人类第9号和第22染色体发生断裂易位形成费城染色体（Ph染色体）导致BCR-ABL融合基因有关。二、BCR-ABL1融合基因ABL1为原癌基因，位于9号染色体q34(长臂三区四带)，基因产物是一种非受体型酪氨酸蛋白激酶；BCR基因位于22号染色体q11（长臂一区一带）。由于9号和22号染色体长臂易位，导致9号染色体长臂（9q34）上的原癌基因ABL和22号染色体（22q11）上的BCR（B-cellreceptor）基因重新组合形成的一种融合基因。
图1：BCR-ABL1融合基因发生机制示意图
根据BCR基因断裂点的不同，主要可分为M-BCR(p)，m-BCR(p)，μ-BCR(p)三种。95%以上CML患者BCR/ABL融合基因为M型，主要是b2a2型（40%）和b3a2型（55%）。
①M型：包括b3a2(e14a2)或b2a2(e13a2)，编码相对分子质量KD的BCR-ABL1融合蛋白，见于绝大部分CML和部分成人ALL；
②m型：e1a2，编码相对分子质量KD的BCR-ABL1融合蛋白，见于60%～70%Ph+的成人ALL、80%Ph+的儿童ALL；
③μ型：e19a2，编码相对分子质量KD的BCR-ABL1融合蛋白。
图2：BCR-ABL1融合基因常见类型的融合示意图[3]
BCR-ABL融合基因编码了一种异常的融合蛋白，即为BCR-ABL融合蛋白。与正常的ABL蛋白相比，BCR-ABL融合基因具有持续活化的酪氨酸激酶活性，可导致自身酪氨酸残基及许多重要的底物蛋白磷酸化，从而激活多个细胞信号通路，如RAS/MAPK和PI3K/AKT等，促进白血病细胞在骨髓中多度增殖和不受控制的增长，抑制正常造血过程。图3：BCR-ABL1激活的信号通路示意图[3]三、分子检测(BCR-ABL与ABL激酶区突变)在CML诊疗中的意义
分子检测贯穿CML整个诊疗过程，包括疾病类型的诊断，治疗方案的选择，疗效及病程监测，停药时机判断和停药后复发监测等，都需要进行BCR-ABL定量检测，同时，病程监测过程还需要进行ABL激酶区突变的检测。
图4：慢性髓性白血病诊治流程图[9]
1、CML诊断
如果患者出现疑似CML的症状，如白细胞（whitebloodcell，WBC）增多或伴脾大，外周血中可见髓系不成熟细胞等，则需要进一步进行Ph染色体和/或BCR-ABL融合基因的检测，若结果为阳性，则可确认为CML。
2、预后监测，疗效评估
首个酪氨酸激酶抑制剂（tyrosinekinaseinhibitor，TKI）伊马替尼的问世，显著地改善了CML患者生存期，80%～90%的患者的生存期接近正常人。随后，二代、三代TKI也陆续面世。CML-CP患者一线TKI包括伊马替尼、尼洛替尼等。CML的治疗目标包括延长生存期、减少疾病进展、改善生活质量和获得无治疗缓解（即停药）。
TKI治疗过程中，定期监测患者体内BCR-ABL融合基因的水平，有助于临床医生了解疾病的进展和治疗的效果。TKI治疗期间的监测包括血液学、细胞遗传学、分子学和ABL激酶区突变反应分析等。相较于血液学反应和细胞遗传学反应，分子学反应代表着CML病情更深层次的缓解。《慢性髓性白血病诊疗指南（年版）》推荐CML治疗期间定期进行分子学监测，检测体内BCR-ABL转录物水平。如果BCR-ABL基因的水平持续下降，说明治疗有效；如果水平上升，可以结合其他临床指标综合考虑调整治疗方案，有助于保证治疗的依从性。伊马替尼目前是治疗CML的一线药物，大于80%的患者可以长期无病生存；但少数患者因为激酶区发生突变导致对伊马替尼耐药而发生疾病进展，在治疗过程会对疗效和耐药情况进行定期检测，以及时换药或改变治疗方案。因此，《慢性髓性白血病诊疗指南（年版）》也推荐治疗期间需要定期进行ABL激酶区突变的检测，以及时发现ABL激酶区点突变，发现早期耐药，预测远期疗效，指导个体化治疗干预，降低总体治疗费用。
表1：CML患者的治疗分子学反应[9]
图5：NCCN指南中推荐治疗周期过程中监测BCR-ABL1[15]四、迈杰医学对CML诊疗过程分子检测的整体解决方案《慢性髓性白血病诊疗指南（年版）》推荐分子学监测采用实时定量逆转录PCR（qRT-PCR）方法，精确识别体内BCR-ABL转录物水平，是最常用和敏感的评估CML疾病负荷的方法；推荐ABL激酶区突变可采用Sanger测序法，或针对BCR-ABL激酶区的二代测序。对于主要融合基因BCR-ABL1，迈杰医学基于荧光qRT-PCR法，自主研发了人BCR-ABL1融合基因定量检测试剂盒，用于定量检测人BCR-ABL1p融合基因。
本试剂盒特点：
※检测范围广：兼容e13a2、e14a2两种融合类型
※操作简便：一步法逆转录荧光定量PCR，逆转录和PCR扩增过程一步完成，操作便捷
※灵敏度高：LOQ为0.%，达到MR4.5
※可溯源性：检测结果可溯源至WHO标准品，检测结果的标准化与准确度不直接依赖实验室标准化
同时，迈杰医学基于荧光qRT-PCR法，针对BCR-ABL少见型融合基因类型开发了BCR-ABL融合定量检测试剂盒和BCR-ABL1融合定量检测试剂盒。对于ABL激酶区突变检测，迈杰医学分别基于Sanger测序法和荧光PCR法开发了相应的试剂盒，操作简便，成本低，报告周期短，且可以相应满足检测范围广和灵敏度高的需求。
此外，迈杰医学有幸作为中国食品药品检定研究院BCR-ABL1检测试剂盒行业标准建立的协助单位，参与标准的起草以及相应标准品的检测和定量，助力BCR-ABL1融合基因检测试剂盒中国行业标准的建立。
参考文献
[1]FaderlS,KantarjianH,TalpazM,EstrovZ.ClinicalSignificanceofCytogeneticAbnormalitiesinAdultAcuteLymphoblasticLeukemia.JAmSocHematol.;94(5):–.
[2]Mertens,Fredrik,etal.Theemerging
